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分析PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)儀的操作規(guī)程

更新時(shí)間:2020-06-09點(diǎn)擊次數(shù):1230
  PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)儀是指通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程的儀器。結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量分析,計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程。

  PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)儀的操作規(guī)程:
  1、開機(jī):
  a、依次打開電腦顯示器和電腦主機(jī)的電源開關(guān),進(jìn)入Windows界面;
  b、接著打開AB7500儀器電源開關(guān),預(yù)熱10分鐘;
  c、點(diǎn)擊SDS軟件。
 
  2、檢測(cè):
  a、選擇File-New-新建,在New Document Wizard窗口中,從Assay下拉列表中選擇反應(yīng)類型:相對(duì)定量,定量,等位基因鑒別或陽(yáng)性陰性實(shí)驗(yàn),從Container下拉列表中選擇反應(yīng)板類型,在Default Plate Name中輸入反應(yīng)板文件名,點(diǎn)擊Next,選擇需要添加到反應(yīng)板文件的探針,點(diǎn)擊Next,為每個(gè)孔探針和任務(wù),單擊Finish。
  b、在Well Inspector-View-Well Inspector中輸入樣品名。
  c、運(yùn)行相應(yīng)的反應(yīng)類型程序,選擇Instrument設(shè)定PCR條件。
  d、點(diǎn)擊Save下拉菜單下的Save As,輸入文件名,點(diǎn)擊save,關(guān)閉設(shè)置界面。
  e、按壓儀器托盤上的按壓位,待托盤彈出后,將所需檢測(cè)反應(yīng)板放入檢測(cè)孔位,再次按壓托盤使其滑入儀器,點(diǎn)擊Start開始檢測(cè)。
 
  3、結(jié)果分析:PCR反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果,對(duì)擴(kuò)增曲線進(jìn)行分析,選擇Analysis-Analysis Settings 選擇Auto Ct,軟件自動(dòng)為每個(gè)反應(yīng)空生成基線和閾值,也可根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline的Start值、End值,Threshold值,點(diǎn)擊Analyze進(jìn)行再次分析。
  4、關(guān)機(jī):實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取出反應(yīng)管,順序關(guān)閉AB7500軟件、定量PCR儀電源,關(guān)閉電腦。
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